敬钊毒素JTZX-III突变体(M1M2M3)基因的重组表达与鉴定

敬钊毒素JTZX-III突变体(M1M2M3)基因的重组表达与鉴定(毕业论文5700字)
摘要：敬钊缨毛蛛分布于广西海南等地。JZTX-III是该蜘蛛的毒液成分中的一种主要成分。为了研究该毒素与离子通道的分子机制，本实验对JZTX-III进行定点突变，以JZTX-III的突变体(M1,M2,M3)为主要目的基因构建表达载体pVT102U/α后再转化至酿酒酵母S-78组成的真核表达系统进行表达鉴定。实验内容包括表达载体构建和转化；酵母发酵表达；及表达产物的分离纯化三个部分。
关键词： 载体pVT102U/α, 酵母S-78  突变体

RECOMBINANT EXPRESSION AND IDENTIFICATION OF JZTX-III’S MUTANTS(M1, M2 ,M3)
Abstract:JingZhaotoxin spider The spider‘s Chilobrachys jingzhao is found in Guangxi and Hainan. JZTX-III is the spider's venom components of a major component. In order to study the toxin and the molecular mechanism of ion channels, the experiments carry out on JZTX-III mutants (M1, M2, M3) as the main target gene expression vector immigration pVT102U / α and then transferred to yeast S-78 eukaryotic expression system composed of to express identification. The contents include the recambinant vector construction and transformation; yeast fermentation; and Purification of the supernatant of theculture.
Keyword：pVT102U/α  Saccharomyces Cerevisiae strain S-78  mutant
 

目    录
摘  要    1
关键词    1
1前言    1
2材料与方法    2
2.1真核表达质粒与菌株    3
2.2 试剂    3
2.3 主要实验仪器    3
2.4 真核表达培养基    4
2.5 引物设计    4
2.6 PCR扩增基因    4
2.7毒素基因的克隆    4
2.8酵母感受态细胞的制定    5
2.9质粒转入载体试剂    5
2.10 蛋白的表达    5
2.11 蛋白的纯化    5
2.12 质谱鉴定    6
3结果与分析    6
3.1JZTX-III及其突变体的载体构建    6
3.2多肽表达及纯化    7
3.3 质谱鉴定    7
4讨  论    8
参考文献    9
致谢    11