一株抗氧化酵母的筛选及鉴定

一株抗氧化酵母的筛选及鉴定(论文11000字)
摘要
酵母作为现代工业使用最广泛的生产菌，尤其是在生产酒精等方面。然而在工业生产过程中同时会出现多种不利菌体生长的因素，例如高温、高渗、低pH等环境，这些胁迫往往都会导致氧化胁迫，因此研究氧化胁迫同时可以为找到提高工业菌株的方法提供研究基础。
本课题采用传统育种手段，通过三级筛选的方法，从葡萄上筛选到一株具备一定抗氧化能力的酵母，通过ITS基因菌种鉴定系统鉴定后确定筛选得到的酵母菌株的种属是汉逊酵母，并命名为DebaryomyceshanseniiNCY-33。通过测定获得了30℃，180r/min以2%接种量在50ml YPD培养的生长曲线。NCY-33在YPD培养基内生长和新陈代谢速度快。NCY-33对DPPH的降解能力达到37%，脂质抗氧化能力达到67.15%。该酵母在含2mmol/L过氧化氢的YPD液体与固体培养基上皆能正常生长。10mmol/L 短暂处理后仍有大量菌体存活。

关键词： NCY-33；生长曲线；脂质抗氧化能力；基因序列分析法
 
Screening and Identification of an antioxidant yeast
ABSTRACT
Yeasts are used as the most widely used bacteria in modern industry, especially in the production of alcohol and so on. However, in the process of industrial production, there are many factors such as high temperature, high permeability, low pH and so on. These stresses often lead to oxidative stress. Therefore, the study of oxidative stress can be used to find the method of improving industrial strains Provide the basis for research.
In this study, a yeast with certain antioxidant ability was screened from the grapes by means of the three-stage screening method. After identification by the ITS gene identification system, the genotypes of the yeast strains were identified. Yeast, and named DebaryomyceshanseniiNCY-33. The growth curve at 30 ° C and 180 r / min at 50% YPD was obtained by 2% inoculation. NCY-33 grows and metabolizes rapidly in YPD medium.NCY-33 degrades DPPH to 37%, and the antioxidant capacity of lipid reaches 67.15%. The yeast was normally grown on YPD liquid containing 2 mmol / L hydrogen peroxide and solid medium. 10mmol / L after a short treatment still a large number of bacteria to survive.

Key words：NCY-33；Growth curve；Lipid antioxidant capacity；Gene sequence analysis
 

目录
摘要    I
ABSTRACT    II
第一章前言    1
1.1  引言    1
1.2  自由基    1
1.3  自由基的作用    1
1.3.1  自由基的有益作用    1
1.3.2  自由基的有害作用    2
1.4  酵母抗氧化系统    2
1.4.1  氧化应激酶系统    2
1.4.2  非酶抗氧化体系    2
1.5  酵母菌鉴定方法    3
1.5.1  快速分类鉴定法    3
1.5.2  分子生物学鉴定技术    3
1.6  研究意义    3
1.7  研究背景    4
1.8  研究路线    4
第二章材料与方法    1
2.1  材料    1
2.1.1  来源    1
2.1.2  培养基    1
2.1.3  主要仪器    1
2.1.4  主要试剂    2
2.2  实验方法    2
2.2.1  酵母菌的富集    2
2.2.2  一级筛选    3
2.2.3  二级筛选    3
2.2.4  三级筛选    3
2.2.5  斜面保藏    4
2.2.6  甘油冷冻保藏    4
2.2.7  测定生长曲线    4
2.2.8  菌种鉴定    4
2.2.9  生长曲线测定    6
2.2.10  过氧化氢耐受能力测定    6
第三章结果    8
3.1  菌株的筛选    8
3.1.1  一级筛选    8
3.1.2  二级筛选    8
3.1.3  三级筛选    9
3.1.4  脂质抗氧化能力的测定    10
3.2  菌株的菌种鉴定    10
3.3  生长曲线测定    13
3.4  不同条件下过氧化氢耐受情况    14
3.4.1  不同浓度过氧化氢的YPD液体培养基生长情况    14
3.4.2  不同浓度的过氧化氢短时间应激    14
3.4.3  不同浓度过氧化氢YPD固体培养基生长情况    14
第四章结论与展望    16
4.1  结论    16
4.2  展望    16
参考文献    17
致谢    19